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多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒图片
产品货号:
SY0280
中文名称:
多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
英文名称:
Multi One Step Cloning Kit
产品规格:
10T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp~20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶Exnase的催化下,仅需反应30 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。

试剂盒中包含有针对多片段重组反应而优化的反应缓冲液和重组酶Exnase。使用该试剂盒,可以一次实现多至5个片段的顺序拼接克隆。Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。

该试剂盒可用于多片段拼接克隆、全基因合成和DNA定点突变。

产品组份:

5×CE Buffer——————40 μl
Exnase——————20μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
Control insert Mix(0.5 kb, 10 ng/μl; 1 kb, 20 ng/μl; 2 kb, 40 ng/μl)————5μl

实验流程概览

1) 线性化克隆载体制备;
2) 插入片段扩增引物设计;
3) 插入片段PCR扩增;
4) 进行重组反应;
5) 反应产物转化、涂板;
6) 克隆鉴定.


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